Tmf1-Flox小鼠是一款条件性基因敲除小鼠,可用于在特定细胞或组织类型中研究TATA元件调节因子1(TATA element modulatory factor 1,TMF1)的功能。TMF1由Tmf1基因编码,也被称为雄激素受体相关蛋白160(androgen receptor-associated protein of 160 kDa,ARA160)。TMF1可结合HIV-1的TATA元件,抑制TATA结合蛋白(TATA-binding protein,TBP)介导的转录激活;同时,它还被报道可作为雄激素受体的潜在共激活因子,并参与介导信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的降解。

除转录相关功能外,TMF1还是一种高尔基体相关蛋白(golgin),能够结合小GTP酶Rab6,并影响高尔基体形态。在细胞内,TMF1参与两条依赖Rab6的逆向转运途径:从内体到高尔基体,以及从高尔基体到内质网。其亚细胞定位涵盖细胞质、细胞核和高尔基体膜,在多种组织和细胞类型中均有表达,组织特异性较低。
为什么需要条件性敲除
TMF1同时涉及转录调控、蛋白降解和膜转运等多个过程,并在多种组织中表达。若采用全身性基因敲除,观察到的表型可能来自多个组织、多条通路的共同改变,难以判断某一变化源自哪类细胞中的TMF1缺失。在研究者关注的细胞类型中单独敲除该基因,有助于把分析范围限定在明确的细胞背景内。
条件性基因敲除为此提供了可行的方案:借助Cre-loxP重组系统,Cre重组酶识别loxP位点并切除两个位点之间的DNA片段,基因敲除仅发生在表达Cre的细胞或组织中。
品系构建策略
南模生物Tmf1-Flox小鼠在小鼠Tmf1基因第2外显子(exon2)两侧分别插入loxP位点。该品系可与组织特异性Cre工具鼠交配,获得在特定细胞类型或组织中敲除Tmf1基因的小鼠模型。
使用方式
研究者可根据所关注的组织或细胞类型,选择相应的组织特异性Cre工具鼠与该品系交配,经后续繁育获得在目标细胞中缺失Tmf1的实验动物。借助这类模型,可在特定细胞类型中探究TMF1与高尔基体逆向转运、雄激素受体相关的转录调控、STAT3蛋白稳态等过程的关系,并观察相应的生理或病理表型。
